การศึกษากลไกการควบคุมระดับโมเลกุลของการสร้างสารกลุ่มแคนนาบินอยด์ในพืชสกุลกัญชา = Molecular regulation of cannabinoids biosynthesis in cannabis plants / Rujira Deewatthawong [et al.]
โดย: Rujira Deewatthawong
ผู้แต่งร่วม: Rujira Deewatthawong | Borworn Tontiworachai | Supavadee Chanapan | Papitchaya Kongchinda | Pornjarus Singhavorachai | Nattaya Montri | รุจิรา ดีวัฒนวงศ์ | บวร ตันติวรชัย | สุภาวดี ชนะพาล | ปพิชญา กองจินดา | พรจรัส สิงหวรชัย | นาตยา มนตรี
BCG: เกษตรปลอดภัย TRM: นวัตกรรมการเกษตร ข้อมูลการพิมพ์: Pathumthani : Thailand Institute of Scientific and Technological Research, 2025 รายละเอียดตัวเล่ม: 105 p. : tables, ill. ; 30 cm.ชื่อเรื่องอื่นๆ: รหัสโครงการ : 6618201034หัวเรื่อง: กัญชา | แคนนาบินอยด์ | biosynthesisสาระสังเขป: This study aims to identify transcription factors (TF) regulating promoter in cannabinoid pathway of Cannabis sativa. Promoters of olivetolic acid cyclase (OAC), Geranylpyrophosphate olivetolate geranyltransferase (GOT or PT), cannabidiolic acid synthase (CBDAS), and Δ 9 -tetrahydrocannabinolic acid synthase (THCAS) were isolated from Cannabis sativa using polymerase chain reaction. PCR products were then cloned into pGEM-T Easy vector and the recomibant DNAs were then transformed into E. coli. DNA sequences were analyzed and all recombinant DNAs were cloned into pENTR 5’-TOPO vector. All samples were cloned into R4L1pDEST_HISi vector for identification of TF using Improved Yeast one hybrid method by screening with Arabidopsis TF cDNA library. TFs involved with the 5 Cannabis promoters were used to prepare effector plasmids by cloning into p35SVP16 vector and reporter plasmids were prepared by cloning each promoter at 5’ end of Luc gene in p190LUC-NOS vector for further transient expression assay. The study found 5 groups of TFs including B3, FHA, GeBP, HD and NAC interacted with OAC promoter region, while ARID, B3, HD, NAC และ ZF_HD involved with PT4 promoter. TFs interacted with CBDAS promoter were B3 and HD. TFs involved with THCAS promoter included ARID, B3, bZIP, CPP, GeBP, HD and NACสาระสังเขป: งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อหา Transcription factor (TF) ที่ควบคุมโปรโมเตอร์ในกระบวนการสร้างแคนนาบินอยด์ของกัญชา ทำการโคลนชิ้นส่วนโปรโมเตอร์ olivetolic acid cyclase (OAC), Geranylpyrophosphate olivetolate geranyltransferase (GOT or PT), cannabidiolic acid synthase (CBDAS), และ Δ 9 -tetrahydrocannabinolic acid synthase (THCAS) โดยการทำ polymerase chain reaction จากนั้นโคลนเข้าสู่เวกเตอร์ pGEM-T Easy จากนั้นถ่ายดีเอ็นเอลูกผสมเข้าสู่ E. coli เพื่อเป็นเซลล์เจ้าบ้านสำหรับเพิ่มปริมาณ ทำการวิเคราะห์ลำดับเบสของแต่ละโปรโมเตอร์ จากนั้นทำการโคลนเข้าสู่ pENTR 5’-TOPO จากนั้นทำการโคลนเข้าเวกเตอร์ R4L1pDEST_HISi แล้วนำตัวอย่างไปทำการจำแนก TF ด้วยวิธี Improved Yeast one hybrid ด้วยการสกรีนกับ TF cDNA library จากการจำแนก TF ที่เกี่ยวข้องกับการควบคุมการทำงานของยีน OLS, OAC, PT4 และ THCAS นำ TF ที่จำแนกได้มาเตรียม Effector plasmid โดยการโคลนยีนของ TF ใส่เข้าไปใน p35SVP16 vector และเตรียม Reporter plasmid โดยการใส่โปรโมเตอร์เป้าหมายเข้าไปที่ด้านปลาย 5’ ของยีน Luc ในเวกเตอร์ p190LUC-NOS เพื่อใช้สำหรับการทดสอบ Transient Expression Assay ผลการทดลองพบว่าโปรโมเตอร์ OAC มี TF ที่เกี่ยวข้องจำนวน 5 กลุ่ม ได้แก่ B3, FHA, GeBP, HD และ NAC สำหรับโปรโมเตอร์ PT4 มี TF ที่เกี่ยวข้องจำนวน 5 กลุ่ม ได้แก่ ARID, B3, HD, NAC และ ZF_HD โปรโมเตอร์ CBDAS พบ TF ที่อาจเกี่ยวข้องกับการควบคุมการทำงาน 2 กลุ่ม ได้แก่ B3 และ HD โปรโมเตอร์ THCAS มี TF ที่เกี่ยวข้องจำนวน 7 กลุ่ม ได้แก่ ARID, B3, bZIP, CPP, GeBP, HD และ NAC
ไม่มีรายการทางกายภาพสำหรับระเบียนนี้
There are no comments on this title.