วิจัยและพัฒนาการผลิตเอนไซม์เซลลูเลสจากจุลินทรีย์ดัดแปลงทางพันธุกรรมเพื่อพัฒนาอุตสาหกรรมการผลิตเอทานอลอย่างยั่งยืน = Research and development on the industrial production of cellulase enzyme from genetically modified microorganisms for sustainable ethanol production / Pongsathon Phapugrangkul [et al.] (CONFIDENTIAL)
โดย: Pongsathon Phapugrangkul
ผู้แต่งร่วม: Pongsathon Phapugrangkul | Somporn Moonmungmee | Nuttapon Vachiraroj | Achara Chaiongkarn | Siwatt Thaiudom | Amorn Owatworakit | Sayan Tanpanich | พงศธร ประภักรางกูล | สมพร มูลมั่งมี | ณัฐพล วชิรโรจน์ | อัจฉรา ไชยองค์การ | ศิวัฒ ไทยอุดม | อมร โอวาทวรกิจ | สายันต์ ตันพานิช
ชื่อชุด: Res. Proj. no. 62-04, Sub Proj. no. 2; no. 1 (Final report) (CONFIDENTIAL)ข้อมูลการพิมพ์: Pathumthani : Thailand Institute of Scientific and Technological Research, 2024 รายละเอียดตัวเล่ม: 61 p. : tables, ill. ; 30 cm.ชื่อเรื่องอื่นๆ: โครงการวิจัยที่ ภ.62-04 การพัฒนาเทคโนโลยีเชิงพาณิชย์เพื่อการผลิตเซลลูโลสิกเอทานอลจากวัสดุเหลือทิ้งทางอุตสาหกรรมเกษตรหัวเรื่อง: เอนไซม์เซลลูเลส | Endo-glucanase | การผลิตเอทานอลอย่างยั่งยืนสาระสังเขป: This study, cellulase genes such as endo-glucanase, exo-glucanase, and beta-glucosidase were selected from CAZY Database and NCBI database, and used for synergistic work in the degradation of lignocellulose materials. The gene cloning technique is divided into 2 systems: full length gene and mature gene to compare the expression level of the gene by testing the activity of enzymes for substrate digestion. The result indicated that cloning of mature endo-glucanase gene into E. coli BL21 (DE3) pLysS showed better gene expression level and substrate digestion. Exo-glucanase and beta-glucosidase have better gene expression level and cellulase activity when cloning the full length gene. Analysis of endo-glucanase, exo-glucanase and beta-glucosidase enzyme activity were performed by using specific substrates such as carboxymethyl cellulose, beta-glucan and p-Nitrophenyl β-D-glucopyranoside (pNPG), respectively showing that endo-glucanase enzyme work best at 10 minutes around pH 10 at 40 oC while exo-glucanase enzyme are suitable with pH 5, 60 oC, at 5 minutes. The optimum conditions for beta-glucosidase enzyme was at pH 6, 40 oC and 5 minutes.สาระสังเขป: จากการศึกษาวิจัยและพัฒนาการผลิตเอนไซม์เซลลูเลส จากจุลินทรีย์ดัดแปลงทางพันธุกรรมเพื่อพัฒนาอุตสาหกรรมการผลิตเอทานอลอย่างยั่งยืน โดยทำการคัดเลือกกลุ่มยีนเซลลูเลส จากฐานข้อมูล CAZY Database และ NCBI ได้แก่ Endo-glucanase, Exo-glucanase, Beta-glucosidase เพื่อนำมาใช้ในการศึกษาการทำงานร่วมกันในการย่อยสลายวัสดุลิกโนเซลลูโลสนั้น ซึ่งได้แบ่งการโคลนยีนเป็น 2 แบบ คือ Full length gene และ Mature gene เพื่อเปรียบเทียบความสามารถในการแสดงออกของยีน โดยทำการทดสอบกิจกรรมการทำงานของเอนไซม์ในการย่อยสับสเตรทบน CMC agar plate และในหลอดทดลอง พบว่า การโคลนยีน Endo-glucanase เข้าสู่เชื้อ E. coli BL21 (DE3) pLysS แบบ Mature gene มีการแสดงออกของยีนและสามารถย่อยสับสเตรท CMC agar plate ได้ ส่วนยีน Exo-glucanase และ Beta-glucosidase มีการแสดงออกของยีนและมีกิจกรรมของเอนไซม์เซลลูเลสเมื่อทำการโคลนยีนแบบ Full length gene การวิเคราะห์สภาวะที่เหมาะสมในการทำงานของเอนไซม์ Endo-glucanase, Exo-glucanase และ Beta-glucosidase โดยใช้สับสเตรทที่จำเพาะ ได้แก่ carboxymethyl cellulose, beta-glucan และ p-Nitrophenyl β-D-glucopyranoside (pNPG) ตามลำดับ โดยวัดค่ากิจกรรมการทำงานของเอนไซม์ในช่วงที่มีค่ากิจกรรมสูงที่สุด เป็นสภาวะที่เหมาะสมในการทำงานของเอนไซม์แต่ละชนิด สามารถสรุปได้ว่า เอนไซม์ Endo-glucanase มีสภาวะที่เหมาะสมต่อการทำงานที่ค่ากรด-เบส เท่ากับ 10, อุณหภูมิเท่ากับ 40 องศาเซลเซียส ที่เวลา 10 นาที, เอนไซม์ Exo-glucanase มีสภาวะที่เหมาะสมต่อการทำงานที่ค่ากรด-เบส เท่ากับ 5, อุณหภูมิเท่ากับ 60 องศาเซลเซียส ที่เวลา 5 นาที และเอนไซม์ Beta-glucosidase มีสภาวะที่เหมาะสมต่อการทำงานที่ค่ากรด-เบส เท่ากับ 6, อุณหภูมิเท่ากับ 40 องศาเซลเซียส ที่เวลา 5 นาที ตามลำดับ
ไม่มีรายการทางกายภาพสำหรับระเบียนนี้
Click on an image to view it in the image viewer
There are no comments on this title.