อนุสิทธิบัตรเรื่อง กระบวนการสกัดสารจากเห็ดหิ้งที่มีฤทธิ์ต้านเชื้อแบคทีเรีย= อนุสิทธิบัตรเลขที่ 1601005433 Bhusita Wannissorn [et al.] (CONFIDENTIAL)
โดย: Bhusita Wannissorn
ผู้แต่งร่วม: Bhusita Wannissorn | Siripen Jarikasem | Prapaipat Klungsupaya | Krittiya Thisayakorn | Thanwarat Kajsongkram | Thanchanok Muangman | Wipaporn Phatvej | Tuanta Sematong | Worawan Teatrakul | Supatjaree Reungsomwongs | Tanes Tachasaen | Juree Tungruethaiwanich | ภูษิตา วรรณิสร | ศิริเพ็ญ จริเกษม | ประไพภัทร คลังทรัพย์ | กฤติยา ทิสยากร | ธัญวรัตน์ กาจสงคราม | ธัญชนก เมืองมั่น | วิภาพร พัฒนเวช | เตือนตา เสมาทอง | วรวรรณ เตียตระกูล | ธเนส เตชะเสน | จุรีย์ ตั้งฤทัยวานิชย์ | สุภัจรี เรืองสมวงศ์
BCG: สารสกัด TRM: สุขภาพ กลุ่มสมุนไพร Language: Thai ชื่อชุด: Res. Proj. no. 56-03, Sub Proj. no. 6; no.1 (Final report) (Confidential)ข้อมูลการพิมพ์: Pathumthani Thailand Institute of Scientific and Technological Research 2019 รายละเอียดตัวเล่ม: 141 p. table, ill. 30 cm.ชื่อเรื่องอื่นๆ: โครงการวิจัยเรื่อง การวิจัยและพัฒนาผลิตภัณฑ์เพื่อสุขภาพระบบกระเพาะอาหาร และลำไส้จากเห็ดพื้นเมืองที่อุดมด้วยสารไทรเทอพีนส์และฟินอลิก | ผลิตภัณฑ์และเทคโนโลยี:ผลผลิต สารสกัดเห็ดหิ้งสีชมพู ใช้ในอาหารเสริม เครื่องสำอาง ยา การนำไปต่อยอด:สารสกัดจากเห็ดหิ้งชมพูกุหลาบ/ผู้ผลิตเห็ดเพื่อประโยชน์ทางยา ในพื้นที่ภาคอีสานหรือภาคอื่นๆ,ผู้ประกอบการสกัดสารสกัดจากธรรมชาติ, ส่งเสริมเกษตรกรในพื้นที่ภาคอีสานและภาคอื่นๆ จุดเด่นของเทคโนโลยี/ ผลิตภัณฑ์:สารออกฤทธิ์ในผลิตภัณฑ์ต่างๆ เช่น อาหารเสริม เครื่องสำอาง เป็นต้น และเพิ่มมูลค่าของเห็ดที่มีประโยชน์ทางยาหัวเรื่อง: Mushrooms | เห็ดสาระสังเขป: Seventy three samples of local mushroom were extracted by ethanol and investigated for various biological activities. From 74 samples of crude extract, only crude extract Sirip 42 from Fomitiopsis cajanderi (Kar) Kolt & Pouzar showed promising biological activities. It had inhibitory activity against S. aureus TISTR 118, L. monocytogenes DMST 1783 and H. Pyroli, both antibiotic resistant and antibiotic sensitive isolates but not for B. breve ATCC 15700, B. bifidum ATCC 25921, L. acidophilus ATCC 4355 and L. plantarum ATCC 8014. MIC values of Sirip 42 to S. aureus TISTR 118 and L. monocytogenes DMST 1783 were >2000 g/ml whereas MIC and MBC values to H. pyroli were 200g/ml indicated that mode of action of Sirip 42 against H. pyroli was bactericidal. Antioxidative activity was evaluated as the scavenging activity of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical. Iit was found that Sirip 42 had mild antioxidant activity with 9.78±0.004.% inhibition at the concentration of 100 µg/ml. The WST assay was used to study cytotoxicity of Sirip 42. It was found that Sirip 42 was toxic to HepG2, MCF-7, CaCo2 and L929 with IC50 values at 2,114 ± 0.074 µg/ml, 779+ 0.007 µg/ml, 1,797.02 + 3.78 µg/ml and 463 ± 0.143 µg/ml, respectively. Anti-inflammatory effect of Sirip 42 was performed in both in vitro and in vivo. Sirip 42 exhibited inhibitory activity to COX-1 (IC500.5298 mg/ml) over 3 times higher than that of COX-2 (IC501.401mg/ml). The IC50COX-2 : COX-1 ratio 2 was greater than 1 indicating that Sirip 42 might be in the same group of non steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs). Sirip 42 also showed significantly anti-inflammatory effects on 1% carrageenan-induced rat paw edema and EPP-induced rat ear edema (p<0.05). Sirip 42 had oral LD50 greater than 2,000 mg/kg body weight. No pathological symptom was observed in the organs. However, the body weight of rat fed with Sirip 42 decreased compared to the control group. Hence, application of Sirip 42 should be carefully considered due to its effect on body weight. TLC fingerprint analysis revealed that Sirip 42 had polar triterpene content. Further purification using repeated chromatography showed that the active ingredient with anti -Helicobacter activity present in Sirip 42 was compound FCT 570, purified triterpene with MW of 570 and 41 carbon atom. Optimal conditions for analysis of total triterpenes present in Sirip 42 crude extract as well as its granule were as follows: Column: XBridgeTM Shield RP18, 150 mm × 4.6 mm i.d., 5 m (Analytical), Solvent: Gradient 0.005%TFA in Water:0.005%TFA in Acetonitrile, Flow rate: 1.0 ml/minute: Injection volume: 20 µl, Detection : Photodiode Array Detector (230 nm)Stability of triterpenes from F. cajanderi (Kar) Kolt & Pouzar was temperature - dependent. It was exhibited that triterpene in either Sirip 42 crude extract or granule form had high stability longer than 9 months when kept at 30º C with 75% RH. The project feasibility was performed with two scenarios, normal and sensitive analysis. Under normal analysis with 50% and 100% investment loan, internal rate of return (IRR) was about 45% and payback period was two years and eight months. Hence, this project was feasible to invest with satisfied return. In the case of sensitive analysis, the feasibility of investment depended on the proportion of investment loan. สาระสังเขป: จากสารสกัดหยาบเห็ดจำนวน 74 ตัวอย่าง พบว่า มีเพียงสารสกัดหยาบ Sirip 42 ที่มีฤทธิ์ทางชีวภาพที่น่าสนใจ สารสกัดหยาบดังกล่าวสามารถยับยั้งเชื้อก่อโรคทางเดินอาหาร S. aureus TISTR 118 และ L. monocytogenes DMST 1783 เชื้อ H. pyroli ทั้งที่เป็นเชื้อดื้อยาและไม่ดื้อยา แต่ไม่มีผลต้านเชื้อเชื้อ B. breve ATCC 15700, B. bifidum ATCC 25921, L. acidophilus ATCC 4355 และ L. plantarum ATCC 8014 ค่า MIC ของสารสกัดหยาบ Sirip 42 ต่อเชื้อ S. aureus TISTR 118 และ L. monocytogenes DMST 1783 มีค่ามากกว่า >2000 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร ในขณะที่ค่า MIC และ MBC ต่อ H. pyroli อยู่ 200 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร เท่ากับค่า MIC บ่งชี้ว่า สารสกัดหยาบ Sirip 42 ออกฤทธิ์ฆ่าเชื้อ ในทางตรงกันข้าม สารสกัดหยาบ Sirip 42 มีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระต่ำ เมื่อทดสอบด้วยวิธี DPPH scavenging assay ที่ความเข้มข้นของสารสกัดหยาบ Sirip 42 100 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร มีค่า % inhibition เท่ากับ 9.78±0.004%. ผลการทดสอบความเป็นพิษของสารสกัดหยาบเห็ดต่อเซลล์มะเร็งด้วยวิธี WST assay พบว่า ค่า inhibitory concentration (IC50 ) ของ Sirip 42 ต่อ เซลล์ HepG2, MCF-7, CaCo2 และ L929 เท่ากับ 2,114±0.074, 779+0.007, 1,797.02+3.78 และ 463±0.143 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร ตามลำดับ. สารสกัดหยาบ Sirip 42 ยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ COX-1 (IC500.5298 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร) ได้มากกว่า COX-2 (IC501.401 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร) เกือบสามเท่า และมีค่า IC50COX-2 : COX-1 มากกว่า 1 แสดงว่า สารสกัดหยาบ Sirip 42 จัดอยู่ในกลุ่มยาต้านการอักเสบที่ไม่ใช่สเตียรอยด์ นอกจากนี้ยังพบว่า สารสกัดหยาบ Sirip 42 สามารถยับยับยั้งการอักเสบอย่างเฉียบพลันของอุ้งเท้าหนูที่เกิดจากหลังจากฉีดสารเหนี่ยวนำ (1% carrageenan) และการอักเสบอย่างเฉียบพลันของใบหูหนูที่ได้รับ EPP ได้อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (p<0.05). สารสกัดหยาบเห็ดรหัส Sirip 42 มีค่า oral LD50 มากกว่า 2,000 มิลลิกรัม/กิโลกรัม น้ำหนักตัว ไม่พบความผิดปกติของอวัยวะภายใน แต่มีผลทำให้อัตราการเพิ่มของน้ำหนักตัวหนูลดลง. ผลการศึกษา ลายพิมพ์องค์ประกอบทางเคมีโดยวิธีรงคเลขผิวบางบ่งชี้ว่าสารสกัดหยาบ Sirip 42 ประกอบด้วยสารไทรเทอร์พีนส์ที่มีความเป็นขั้วค่อนข้างสูง เมื่อนำสารสกัดหยาบ Sirip 42 มาแยกหาสารบริสุทธิ์ที่ออกฤทธิ์ต้านเชื้อ H. pyroli พบว่าสามารถแยกสารบริสุทธิ์ compound FCT 570 ซึ่งเป็นสารกลุ่มไทรเทอร์พีนส์ที่มีมวลโมเลกุล 570 มีคาร์บอน จำนวน 41 อะตอม. สภาวะที่เหมาะสมในการวิเคราะห์ปริมาณสารไทรเทอร์พีนส์รวมในสารสกัดหยาบ Sirip 42 และผลิตภัณฑ์ที่มีสารสกัดหยาบ Sirip 42 คือ คอลัมน์: XBridgeTM Shield RP18, 150 × 4.6 มิลลิเมตร i.d., 5 ไมโครเมตร (Analytical), ตัวทำละลาย: Gradient 0.005%TFA ใน Water: 0.005% TFA ใน Acetonitrile, อัตราการไหล: 1.0 มิลลิลิตร/นาที, ปริมาณสารที่ฉีด: 20 ไมโครลิตร, การตรวจวัด: Photodiode Array Detector (230 นาโนเมตร). เป็นที่สังเกตว่าสารไทรเทอร์พีนส์ในตัวอย่างสารสกัดหยาบเห็ด Sirip 42 และแกรนูลเก็บที่ อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส ความชื้นสัมพัทธ์ 75% มีความคงตัวสูง มีอายุการเก็บไม่ต่ำกว่า 9 เดือน. นอกจากนี้ ได้ทำการวิเคราะห์ความคุ้มทุนของโครงการทั้งในกรณีปกติและสถานการณ์อ่อนไหว พบว่าในกรณีปกติ ที่มีการกู้เงิน 50 และ 100% มีผลตอบแทนการลงทุน ประมาณ 45% และระยะเวลาในการคืนทุน ประมาณ 2.8 ปี จึงมีความคุ้มค่าต่อการลงทุน สำหรับกรณีอ่อนไหว โครงการจะมีความคุ้มค่าในการลงทุนหรือไม่ขึ้นกับสัดส่วนของเงินกู้ที่นำมาลงทุน.
| ชนิดของทรัพยากร | Location | Call number | สถานะ | Last seen | บาร์โค้ด |
|---|---|---|---|---|---|
|
Not For Loan | 2022-07-20 | IP00049 |
There are no comments on this title.